Modificarea fosforilării
Cercetările privind proteinele și peptidele fosforilate pot ajuta oamenii să elucideze mecanismul procesului de mai sus și să înțeleagă în continuare natura activităților vieții. În ultimii ani, odată cu dezvoltarea continuă a tehnologiei proteomice, studiul fosforilării proteinelor a primit o atenție din ce în ce mai larg răspândită. Multe toxine și agenți patogeni naturali își exercită, de asemenea, efectele prin modificarea stării de fosforilare a proteinelor intracelulare.
Polipeptidele fosforilate se referă în principal la Ser, Tyr și Thr. Gruparea hidroxil a lanțului lateral al reziduului este modificată într-o polipeptidă de fosfat acid. Până acum, modificarea de fosforilare a polipeptidelor implică în principal metoda post-fosforilare și două metode de sinteză:
Când este modificat prin metoda monomerului, aminoacidul fosforilat este dificil de condensat cu lanțul peptidic din cauza obstacolului steric cauzat de grupul de modificare a lanțului lateral mai mare, iar introducerea ulterioară a aminoacizilor va fi mai dificilă. În special atunci când conține modificări multiple ale situsului de fosforilare, sinteza va deveni extrem de dificilă, iar produsul final are componente complexe, este dificil de separat și are un randament extrem de scăzut. Prin urmare, atunci când mai multe situsuri din lanțul peptidic sunt fosforilate, poate fi luată în considerare metoda post-fosforilare. Procesul principal de sinteză este de a îndepărta selectiv grupările protectoare ale lanțului lateral ale aminoacizilor care urmează să fie marcați după terminarea sintezei polipeptidei. Pentru Tyr, aminoacizii Thr cu lanțuri laterale neprotejate pot fi utilizați direct pentru reacție. Grupa de protecție a lanțului lateral la 1% TFA/DCM Poate fi îndepărtată cantitativ în anumite condiții. În timpul post-fosforilării, se poate folosi bisbenzil fosforamidit. Tetrazolul generează intermediarul activ fosforamidit tetrazol, care este conectat la gruparea hidroxil și apoi oxidat în condiții peroxiacide pentru a genera o grupare fosforil pentru a finaliza reacția.
- Oferim servicii de modificare a fosforilării pSer, pTyr, pThr și D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
- Modificările de fosforilare a 2 situsuri, 3 situsuri, 4 situsuri și 5 situsuri pot fi efectuate simultan.
Peptide fosforilateCas sintetic (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) așteptați)
1. Există 4 situsuri de fosforilare în secvență (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), puritatea este de 95% și ciclul de finalizare este de 3 săptămâni.
